细胞拉丝的五大常见原因（下）

👉 培养条件不当 如培养基配方错误、培养基中关键营养物质（如氨基酸、维生素、生长因子等）不足、pH值变化、温度波动或气体环境（如CO₂浓度）不适宜，均可能影响细胞正常形态与功能，导致细胞拉丝。 💦解决方法： 使用新鲜配置的培养基培养细胞；根据细胞的生长情况，及时换液，确保培养过程中营养充足；必要时可尝试提高血清使用浓度（终浓度不超过20%）或更换高品质胎牛血清（如图3所示）。 👉 细胞污染 在细胞培养的过程中，若出现细菌、真菌、支原体、黑胶虫等污染，其与细胞争夺营养，同时产生有细胞毒性的代谢产物，将会导致细胞状态明显变差，细胞可能出现拉丝现象。 💦解决方法： 提高细胞培养过程中的无菌操作意识，使用无菌试剂、耗材。对于支原体、黑胶虫等不易察觉的污染，可以定期检测或空培确定是否发生污染。及时发现，及时处理，有效防止污染范围的扩大。 👉 操作不当 在处理如贴壁细胞等需要消化的细胞时，解离试剂的选择、消化时间的控制、操作力度的把握等都至关重要。解离试剂选择不当、消化时间过长或操作力度过大等均可能导致细胞受损，进而引发细胞形态改变，出现拉丝现象。 💦解决办法： 针对不同细胞选择合适的解离试剂，控制消化时间，在消化过程中操作轻柔，最大程度降低消化过程对细胞的损伤。