👉神经干细胞培养及诱导分化必看(上)

普通生物 2025-03-25 16:12:36
💡神经干细胞的基本介绍 神经干细胞可以从不同的组织中分离获得,常见的来源有胚胎、大脑皮层、海马体和脊髓等。为了在体外成功培养神经干细胞,合适的培养体系至关重要,培养基的成分、添加剂的使用、培养条件等因素都对神经干细胞的增殖、存活以及分化状态有着深远的影响。 🔥生长培养基 常用配方:DMEM/F12 + B-27(不含维生素A)+ bFGF + EGF + 双抗 为了更好地满足神经干细胞的培养需求,普诺赛®提供经过配方优化的神经干细胞完全培养基,助力您的神经干细胞培养工作更加高效、稳定。 🔥培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%;温度:37℃ 💡神经干细胞的培养方法 🔥神经干细胞的培养方法主要分为悬浮培养和贴壁培养两大类,这两种方法各具特色,适用于不同的研究需求。 🔥悬浮培养:通过使用未经TC(Tissue Culture)处理、未包被或低吸附的培养器皿和无血清培养基进行培养,自然形成神经干细胞球。 🔥贴壁培养:通过将神经干细胞球消化分散成单个细胞后,接种在经TC处理和包被的培养器皿内,用无血清培养基进行培养,形成贴壁生长的单层细胞。 💡神经干细胞的诱导分化 🔥诱导分化为星形胶质细胞 将神经干细胞球体消化分散后离心,使用星形胶质细胞诱导培养基:DMEM高糖+B-27,含维生素A+N-2+GlutaMAX+FBS+bFGF重悬细胞,铺入多聚赖氨酸包被的培养瓶内培养。随着诱导分化的进行,神经干细胞逐渐转变为星形胶质细胞,其形态变化如图1所示。 🔥诱导分化为少突胶质细胞 与星形胶质细胞诱导方法类似,使用少突胶质细胞诱导培养基:DMEM/F12+B-27,含维生素A+EGF+bFGF+T3+胰岛素诱导神经干细胞分化为少突胶质细胞,其形态变化如图2所示。 🔥诱导分化为神经元细胞 将神经干细胞球体消化分散后离心,使用神经元细胞诱导培养基(Neurobasal神经元培养基+1% N-2+2% B-27含维生素A+NEAA+β巯基乙醇+L-谷氨酰胺)重悬细胞,铺入多聚赖氨酸包被的培养瓶内培养。培养6天后,在神经元细胞诱导培养基中加入10 ng/mL GDNF和10 ng/mL BDNF,以进一步促进神经元的分化。 神经干细胞 神经干细胞培养 细胞转染 普诺赛 普诺赛细胞

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