⚡细胞划痕实验：揭示细胞迁移的秘密！

一、细胞划痕实验的优势与局限性 优势 👉能模拟体内细胞迁移过程； 👉可与活细胞成像结合，实时监测细胞迁移过程； 👉操作简单、成本低，适合大多数实验室开展。 局限性 👉相较其他几种常用检测细胞迁移的实验，细胞划痕实验中细胞长成单层细胞和划痕愈合需要较长时间； 👉细胞划痕实验常用培养皿、6孔板或12孔板培养细胞，这导致细胞和培养基的使用量较大，对于需要使用难以获取的原代细胞或昂贵化学试剂的实验不适用； 👉在细胞划痕实验中无法模拟化学梯度，无法替代Boyden小室法等其他具有趋化性检测能力的实验方法。 二、细胞划痕实验的基本步骤 👉细胞培养 将细胞培养成一层紧密相连的单层细胞（汇合度90%-100%），确保细胞之间没有明显空隙。 👉制造“划痕” 使用移液枪吸头尖端在已经培养好的细胞单层上沿直线方向轻轻刮划，形成人工“伤口”，随后用培养基或PBS清洗掉脱落的细胞，确保划痕边缘平整。 Tips：为了保证在不同时间点进行图像采集时能获得相同的视野，需事先在培养皿或培养板的底部用极细的记号笔画线（如图1）或使用剃须刀片轻轻蚀刻培养容器底部作为参考点的标记。 👉孵育与观察 将培养器皿放入二氧化碳培养箱中孵育一段时间（通常为8-48 h，迁移越快的细胞孵育时间越短），孵育完成后，在显微镜下拍摄划痕区域的照片。 👉数据分析 通过比较初始划痕和孵育后划痕的闭合情况，计算细胞的迁移率。迁移率=（初始距离-最终距离）/初始距离或（初始面积-最终面积）/初始面积。 细胞划痕 细胞迁移 细胞迁移与划痕 普诺赛 普诺赛细胞